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免費代測大鼠多效生長因子 ELISA 檢測試劑盒無錫,鎮江
更新時間:2012-07-02   點擊次數:1400次

 大鼠多效生長因子 ELISA 檢測試劑盒無錫,鎮江

 本試劑僅供研究使用    

試驗原理:
 PTN試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知PTN濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將PTN和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中PTN的濃度呈比例關系。
 
試劑盒內容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標準品:1600pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標準品稀釋緩沖液 1瓶(4.0ml) 1瓶(2.0ml) 即用型
生物素標記的抗PTN抗體 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

 大鼠多效生長因子 ELISA 檢測試劑盒無錫,鎮江

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
1600 pg/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
800 pg/ml (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
400 pg/ml (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
200 pg/ml (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
100 pg/ml (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50 pg/ml (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 pg/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。


操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

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試劑盒性能
 1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的PTN標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的PTN含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-1600pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml
Recombinant Rat Interleukin-10 (rrIL-10 ) 重組大鼠白細胞介素-10 2ug
Recombinant Rat Interferon-γ (rRaIFN-γ) 重組大鼠干擾素-γ 20ug
Recombinant Bovine Fibroblast Growth Factor-basic ( rBobFGF ) 重組牛堿性成纖維細胞生長因子 10ug
Recombinant Ovine Interferon-tau (rOvIFN-tau ) 重組羊干擾素- tau 2ug
Recombinant Human GRO-alpha (rHuGRO-alpha/CXCL1 ) 重組趨化因子 5ug
Recombinant Human GRO-beta/MIP-2 (HuGRO-beta/MIP-2(CXCL2) ) 重組趨化因子 2ug
Recombinant Human GRO-gamma rHuGRO-gamma(CXCL3)) 重組趨化因子 2ug
Recombinant Human ENA-78/CXCL5 (5-78a.a.) (rHuENA-78(CXCL5)) 重組趨化因子 5ug
Recombinant Human NAP-2/CXCL7 (rHuNAP-2/CXCL7) 重組趨化因子 2ug
Recombinant Human Interleukin -8 (72a.a.)(rHu IL-8 72a.a.) 重組人白細胞介素-8(72a.a.) 5ug
Recombinant Human Interleukin -8 (77a.a.)(rHu IL-8 77a.a.) 重組人白細胞介素-8(77a.a.) 5ug
Dimenhydrinate 茶苯海明 [523-87-5] 100g
2,3-Dimercapto-1-propanesulfonic acid, sodium salt, monohydrate 2,3-二巰基丙烷磺酸鈉鹽一水 [207233-91-8] 100g
2,3-Dimercapto-1-propanol 二巰基丙醇 [59-52-9] 100ml
3,4-Dimethoxybenzaldehyde 藜蘆醛 [120-14-9] 500g
1,3-Dimethoxybenzene 間苯二甲醚 [151-10-0] 250ml
1,4-Dimethoxybenzene 對二甲氧基苯 [150-78-7] 5g
3,3’-Dimethoxybenzidine, dihydrochloride 3,3 -二甲氧基聯苯胺鹽酸鹽 [20325-40-0] 100g
Flunixin meglumine 氟尼辛葡甲胺 [42461-84-7] 100g
9-Fluorenone-4-carboxylic acid 9-芴酮-4-甲酸 [6223-83-2] 25g
Fluorescein, free acid 熒光素 [2321-07-5] 100g
DTAC 十二烷基 -*基氯化銨 [112-00-5] 250g
3,5-Dimethoxybenzoic acid 3,5-二甲氧基苯甲酸 [1132-21-4] 250g
2,7-Dimethoxynaphthalene 2,7-二甲氧基萘 [3469-26-9] 100g
N,N-Dimethylacetamide N’,N-二甲基乙酰胺 [127-19-5] 250ml
6-Dimethylallylaminopurine 6-(異戊烯基氨基)嘌呤 [2365-40-4] 1g
6-Dimethylallylamino purine riboside (2iP Riboside) 6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤核苷 [7724-76-7] 100mg
Dimethylamine hydrochloride 二甲胺鹽酸鹽 [506-59-2] 500g
4-(Dimethylamino)-benzaldehyde 4-(二甲氨基)苯甲醛 [100-10-7] 100g
 

上海通蔚生物科技有限公司

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地址:上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄2號3463室

主營產品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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